心肌缺血再灌注损伤模型

2019-02-28 16:08:56 admin 233

心肌缺血再灌注损伤模型

心肌缺血再灌注损伤模型

模型制作方法:

(1)小鼠腹腔注射麻醉,待麻醉生效后,采用自制小鼠插管(20G静脉套管针外鞘及自制导丝,长度30mm)行气管插管,成功后接小鼠呼吸机控制呼吸(频率是90~110次/min,潮气量0.3~0.4ml)。
 
(2)胸骨左侧切开皮肤,此处有静脉,用止血钳夹下即可不出血。钝性分离肌肉见肋骨,在第3肋间隙用眼科剪轻轻向下分离肋间肌,很多参考文献报道剪断3、4肋骨,用拉钩拉开胸壁。华联科动物实验平台经过多次实验后做了优化,用2个撑开器配合在第3肋间隙撑开,可以做到不出一滴血,见图:

华联科实验中心

(3)小心剪开心包膜,用棉签轻压住心脏。在左心耳下缘3~4mm进针,进针深约1.5mm,斜向右上方肺动脉圆锥方向出针,针距约3~4mm,分别将线两端穿入小圈内。留线暂不结扎(因缝针刺激心脏会出现心律失常)。稳定3-5分钟后再收紧结扎线,连同小段聚已烯管结扎(起压迫血管作用)。立即观察心电图,以出现QRS高大增宽为结扎成功标志(S-T段不一定可见改变,见文献),记时缺血时间。40分钟后轻拉松结线,打开血管再灌注,立即观察心电图,数分钟后应该出现QRS回落变窄。再灌注180分钟,注意观察再灌注心律失常.
闭胸逐层缝合:    
                                                                                                        

华联科实验中心

华联科实验中心

(4)术后维持体温直接影响到成活率,可用电热毯维持体温。26-28℃之间:

华联科实验中心

(5)见排尿可拔管,气管处一针缝合,再缝合皮肤,放回笼观察。
(6)TTC和Evans blue双染图:
Evans blue染液注射后取心脏,可明显看到缺血区域:
小鼠双染图:

大鼠双染图:


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